CoAnn Technology Self-packing column

많은 실험실에서 capillary  tubing 을 사용하여 nano-column을 만든후   C18을  직접 충진해서 사용합니다. 특별히 어려운일은 아니지만 packing 되는 과정에서 문제점이 발생하기도 합니다. 대표적인것이 고압력으로 인해 원하는 길이 만큼 충진이 되지 않는것입니다.

 

여러가지 원인이 있겠지만 C18이 컬럼의 앞쪽 emitter 부분에서 일정하게 충진이 되지 않으면서 고압력이 생기는 경우가 많습니다.  Newobjective사에서 판매되는  Empty컬럼 처럼  emitter안에 Frit이 있을 경우 이러한 문제점을 어느정도 해결할수 있습니다.  하지만 실험실에서 이러한 컬럼을 직접 만들기는 어렵습니다. 또한  New objective사는 최근에 문을 닫은것으로 알고 있습니다.

 

최근에 CoAnn Technology사를 통해서  Frit이 있는  Empty 컬럼을 구매해서 충진해보았는데 아주 만족합니다.

https://coanntech.com/

 

홈페이지에 소개된 ConAnn의 frit의 모양은 아래와 그림과 같이 충진형태가 약간 다릅니다.

CoAnn Evacuated frit emitter ip (coanntech.com)

링크의 설명에도 있듯이 Frit이 컬럼앞에 완전히 충진이 되어있으면 이것 또한 압력이 높아지는 원인이 된다고 하네요. 그래서 CoAnn컬럼은  약간 듬성듬성하게  Frit이 충진이 되어있습니다.

 

 

가격은 상대적으로 저렴합니다.  한개당  65불정도 됩니다.  만약 잘 충진되어 장기간 사용할수 있다면 시간적으로 비용적으로 장점이 있습니다.  직접구매해서 2.4 µm와 3 µm C18을 각각 30cm, 40cm로 충진을 해보았는데 충진이 잘되었습니다.  3 µm C18의 경우 40 cm이상까지 멈추지 않고 충진이 되었습니다.  아래는 C18을 충진한후 Nano source에 장착한후의 이미지입니다.

아래는 50ng HeLa standard에 대한 크로마토그램입니다.

 

 

 EasySpray 컬럼에서 얻어진 크로마토그램과 비교해보았습니다. 분리능에서 크게 차이가 나지는 않습니다.

 

 

50ng HeLa standard의 1hr LC gradient에서 얻어진 단백질 및 펩타이드 검출수 입니다.  EasySpray 컬럼의 결과와 크게 차이가 나지 않습니다.