Vanquish Neo Needle seat issue

최근에 장비에서 아주 특이한 이슈가 발생하였습니다. 기존에 나오던 피크들중에 중간이후부터가  보이지 않는 현상입니다.

신기한것은 앞쪽의 피크들은 유사한 높이에서  정상적으로 나온다는것이지요. 어떻게 이것이 가능할까요?  질량분석기의 문제인지 LC 문제인지 전혀 알수가 없습니다. 보통 뒤쪽의 피크들이 잘 안나온다면 LC pump의 문제가 주원인입니다. 특히 Buffer B가 정상적으로 작동하지 않아서 Hydrophobic한 피크들이 제대로 용리되지 않기 됩니다. 이 경우에는 전체적으로 peak들의 모양이 넓어지고 RT도 변화게 됩니다. 또한 pump 압력도 정상적이지 않습니다.

 

하지만 이번 경우는 모든것이 정상이고 단지 뒤쪽의 피크들만 사라졌습니다. 제 인생에 처음보는 현상입니다.

 

 

질량분석기 문제라면 어떻게 선택적으로 뒤쪽에 나오는 피크들만 검출이 안될수 있을까요? LC 문제라면 어떻게  뒤쪽의 피크들만 선택적으로 손실이 될까요? 

 

일단 질량분석기의 문제라고 생각하고 엔지니어가 와서 점점을 하고 세척도 하였습니다. 하지만 전혀 문제가 해결되지 않았습니다. 사실 ESI Source에서 Calmix로 체크하였을때 아무런 문제가 없었습니다. 

 

그렇다면 FAIMS의 문제일까요? FAIMS를 장착하지 않은 상태에서도 동일한 이슈가 발생합니다.

 

컬럼의 문제일까요? 서로 다른 컬럼을 다 바꾸어봐도 소용이 없습니다. 이동상을 새로 만들어도 소용이 없습니다.  Vanquis Neo 의 모든 System test Script도 모두 이상없이 통과하였습니다.

Needle Seat의 문제일것이라고 생각했지만 엔지니어가 Needle seat에 대한 체크를 한후 이상이 없다고 결론을 내었습니다.  이 문제로 많은 엔지니어들이 체크를 했고 심각성을 고려해서 자체적으로 Level을 올려서 Factory team이 관여하도록 하였습니다.

결국은 제가 인터넷을 찾아보다가  Needle seat를 교체하고 나서 문제가 해결되었습니다. 이유는 잘모르겠지만 Needle seat에서 hydrophobic 한 펩타이드만 선택적으로 손실이 되었습니다. 혹시 C18 material이 들어간것일까요?

 

새롭게 안 사실은 Needle seat안에  0.2 um의 Filter가 있습니다.  만약 시료에 particle이 존재한다면 아마 여기서 처음으로 걸러질것이라 생각합니다.  이전 글에 Inlet Filter에 관한 글이 있습니다. 

Direct injection mode에서 Inline Filter 사용하기 (tistory.com)

Direct injection mode에서 Inline Filter 사용하기

 Needle seat안의 filter가 제 역활을 한다면 이 Inlet Filter는 사실 소용이 없을것이라 생각합니다. 

Script에서 에서 "Test System Back Pressure" 를 수행할 경우 Needle seat가 막혀있는지 없는지 확인이 가능합니다.  기준 압력보다 높게 되면 경고메세지가 나옵니다. 이것으로 Needle, loop, needle seat의 상태를 어느정도 확인할수 있습니다.

 

 

아무튼 잘 해결이 되어서 다행입니다.