Premier LC/MS Columns

대부분의 나노LC 컬럼은 가격이 $1,000를 넘는 경우가 많습니다. 이는 매우 정밀한 제조 기술과 엄격한 품질 관리가 반영된 결과일 것입니다. 하지만 실험실에서 직접 컬럼을 팩킹해 사용할 경우, 몇 달러 수준의 저렴한 비용으로도 컬럼을 만들 수 있다는 점은 무시하기 어렵습니다. 물론 상용 컬럼은 높은 재현성과 품질, 편의성을 제공하는 장점이 있어 여전히 널리 사용되고 있습니다.

문제는 비용입니다. 아무리 우수한 성능을 가진다 하더라도, 몇 번 사용 후 막혀버릴 수 있는 나노컬럼에 $1,000 이상을 투자하는 것은 실험실 입장에서는 상당한 부담입니다. 만약 저렴한 컬럼이 유사한 분해능을 제공할 수 있다면, 보다 효율적인 선택이 되지 않을까 생각합니다.

 

CoAnn 컬럼: 가성비 높은 대안

현재 저희는 CoAnn Technology에서 판매하는 컬럼을 사용하고 있습니다. 이 컬럼은 약 $500 정도의 가격이지만, 기존 고가의 컬럼과 비교해도 분해능에서 전혀 뒤처지지 않습니다. 가격 대비 성능 면에서 매우 만족스러운 선택입니다. 지속적으로 구매하니 추가적인 할인도 받아서 저렴하게 사용하고 있습니다.

 

https://proteomicstechnology.tistory.com/570

CoAnn Technology nano-column (HEB07502001718IWF)

 

 

PremierLCMS 컬럼 테스트

최근에는 PremierLCMS에서 판매하는 컬럼도 테스트해보았습니다. 대부분의 제품이 $600 내외의 가격대를 형성하고 있으며, 특히 150 µm ID x 15 cm 컬럼 에 관심이 있습니다.  일반적인 75 µm ID 컬럼에 비해 내경이 크고 길이가 짧은 이 컬럼은 몇 가지 장점이 있습니다.

• 높은 유속 가능: 분해능은 다소 떨어질 수 있지만, 높은 유속을 사용할 수 있어 전체 분석 시간을 단축할 수 있습니다.
• 직접 주입(Direct Injection) 방식과 호환: Vanquish Neo 같은 장비에서 Direct Injection 모드를 활용하면 시료 주입 시간까지 절약됩니다.

 

컬럼 연결 방식

 아래 두 가지 연결 타입이 있으며, 사용 목적에 따라 선택이 가능합니다:

• Female-in, Female-out: 컬럼을 Vanquish Neo의 column compartment에 장착하고 가열할 수 있습니다. 다만, Spraytip과 연결할 튜빙이 필요하므로 void volume이 증가할 수 있습니다.

  

  Female-in, Female-out

• Female-in, Male-out: Spraytip에 바로 연결할 수 있어 Tubing을 사용하지 않아도 되니 Void volume이 줄어듭니다.  Heat를 사용하기 위해서는 Source부분에 heater를 설치해야되는 번거로움이 있습니다. 하지만  이 컬럼은 비교적 낮은 압력에서 작동하므로 heating 없이도 사용할 수 있습니다.

 

Female-in, male-out

 

다양한 LC Gradient에서의 PRM 분석 

• 아래는 50 ng HeLa  standard mixture에서 얻은 크로마토그램입니다. Female-in, Female-out 컬럼을 사용하여 긴 tubing으로 Spraytip을 연결하였지만 생각보다 좋은 분해능을 얻었습니다.

 

 

• 50ng HeLa에 BSA 500 amol spiking 후, 다양한 LC 시간(60, 30, 20, 15, 10분)으로 PRM 분석을  크로마토그램입니다.  

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LC 시간이 짧아질수록 Peak area는 다소 감소했지만, 대표적인 펩타이드는 여전히 10분에서도 검출이 가능했습니다.

 

 

• 재현성 있게 검출만 가능하다면, 짧은 LC 시간에서도 시료 간 상대 정량은 충분히 가능 할것입니다.여기에 분석 시간을 최대 1/6로 단축할 수 있다는 장점도 있습니다.

자주 PRM을 분석을 해야 하고 컬럼 가격이 부담이 된다면 이 컬럼도 좋은것 같습니다.